ELISA CASPR1
Muestras:
- Control negativo
- Control positivo CASPR1
- 24-2-405 à BOX 370
- 24-2-406 à BOX 370
- 24-2-407 à BOX 370
- 24-2-408 à BOX 370
- 24-2-409 à BOX 370
- 24-2-410 à BOX 370
- 24-2-411 à BOX 370
- 24-2-412 à BOX 370
- 24-2-413 à BOX 370
- 24-2-414 à BOX 370
- 24-2-415 à BOX 370
- 24-2-416 à BOX 371
- 24-2-417 à BOX 371
- 24-2-418 à BOX 371
- 24-2-419 à BOX 371
Plantilla placa:
1 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
A prot | Cneg | 24-2-407 | 24-2-411 | 24-2-415 | 24-2-419 |
B blanc | Cneg | 24-2-407 | 24-2-411 | 24-2-415 | 24-2-419 |
C prot | Cpos CASPR1 | 24-2-408 | 24-2-412 | 24-2-416 | |
D blanc | Cpos CASPR1 | 24-2-408 | 24-2-412 | 24-2-416 | |
E prot | 24-2-405 | 24-2-409 | 24-2-413 | 24-2-417 | |
F blanc | 24-2-405 | 24-2-409 | 24-2-413 | 24-2-417 | |
G prot | 24-2-406 | 24-2-410 | 24-2-414 | 24-2-418 | |
Hblanc | 24-2-406 | 24-2-410 | 24-2-414 | 24-2-418 |
Protocolo:
- Bloquear con leche 5% en PBS-tween 0’1% : 200 ul pozo (incubar 1h a temp. ambiente)
- Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
- Diluir los sueros:
- Screening: diluir sueros 1/100 en leche 5% en PBS-tween 0’1%
- Incubar con los sueros 1h a RT
- Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
- Ac secundarios:
- Screening / confirmación: Incubar con RAH IgG HRP 1/3000 en leche 5% en PBS-tween 0’1% : 100 ul/pozo, 45 min
- Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
- Incubar 5min con TMB: preparar solución un rato antes y tapar de la luz (para que se atempere) : 100 ul/pozo
- Parar la reacción con 50ul de H2SO4 25%
- Leer a 450-570 nm
Resultado:
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | |
A | 0,147 | 0,118 | 0,129 | 0,14 | 0,152 |
B | 0,159 | 0,149 | 0,147 | 0,138 | 0,449 |
C | 1,193 | 0,157 | 0,156 | 0,126 | 0 |
D | 0,106 | 0,167 | 0,238 | 0,121 | 0 |
E | 0,206 | 0,185 | 0,14 | 0,155 | 0 |
F | 0,155 | 0,174 | 0,292 | 0,136 | 0 |
G | 0,124 | 0,11 | 0,13 | 0,121 | 0 |
H | 0,112 | 0,154 | 0,231 | 0,18 | 0 |