24.03.01: ELISA CASPR1 + titulación y subclases de NF140

ELISA CASPR1 + NF140

Muestras CASPR1

• Control negativo
• Control positivo CASPR1
• 24-2-0372 –> BOX 369
• 24-2-0376 –> BOX 369
• 24-2-0377 –> BOX 369
• 24-2-0378 –> BOX 369
• 24-2-0379 –> BOX 369
• 24-2-0380 –> BOX 370
• 24-2-0381 –> BOX 370
• 24-2-0382 –> BOX 370
• 24-2-0383 –> BOX 370
• 24-2-0388 –> BOX 370
• 24-2-0389 –> BOX 370
• 24-2-0390 –> BOX 370
• 24-2-0391 –> BOX 370
• 24-2-0392 –> BOX 370
• 24-2-0393 –> BOX 370
• 24-2-0394 –> BOX 370
• 24-2-0395 –> BOX 370
• 24-2-0396 –> BOX 370
• 24-2-0397 –> BOX 370
• 24-2-0398 –> BOX 370
• 24-2-0399 –> BOX 370
• 24-2-0400 –> BOX 370
• 24-2-0401 –> BOX 370
• 24-2-0402 –> BOX 370
• 24-2-0403 –> BOX 370
• 24-2-0404 –> BOX 370

Muestra NF 140 Titulación y subclases –>24-2-0384

Plantilla placa:

Protocolo:

• Bloquear con leche 5% en PBS-tween 0’1% : 200 ul pozo (incubar 1h a temp. ambiente)
• Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
• Diluir los  sueros:
  • Subclases:  diluir sueros 1/100 en leche 5% en PBS-tween 0’1%
  • Titulación: diluir sueros a 1/100, 1/300, 1/900, 1/2700, 1/8100 y 1/24300 en leche 5% en PBS-tween 0’1%
• Incubar con los sueros 1h a RT
• Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
• Ac secundarios:
  • Screening / confirmación: Incubar con RAH IgG HRP 1/3000 en leche 5% en PBS-tween 0’1% : 100 ul/pozo, 45 min
  • Subclases: Incubar con IgG1, IgG2, IgG3 o IgG4 1/500 en leche 5% en PBS-tween 0’1% : 100 ul/pozo, 45 min
• Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
• Incubar 5min con TMB: preparar solución un rato antes y tapar de la luz (para que se atempere) : 100 ul/pozo
• Parar la reacción con 50ul de H₂SO₄ 25%
• Leer a 450-570 nm

Resultado: