2024.03.05: ELISA CASPR1

ELISA CASPR1

Muestras:

  • Control negativo
  • Control positivo
  • 24-2-413 –> BOX 370
  • 24-2-414 –> BOX 370
  • 24-2-419 –> BOX 371
  • Muestra Marta –> 20-022

Plantilla placa:

112
A protCneg24-2-419
B blancCneg24-2-419
C protCpos CASPR120-022
D blancCpos CASPR120-022
E prot24-2-413 
F blanc24-2-413 
G prot24-2-414 
H blanc24-2-414 

Protocolo:

  • Bloquear con leche 5% en PBS-tween 0’1% : 200 ul pozo (incubar 1h a temp. ambiente)
  • Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
  • Diluir los  sueros:
    • Screening:  diluir sueros 1/100 en leche 5% en PBS-tween 0’1%
  • Incubar con los sueros 1h a RT
  • Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
  • Ac secundarios:
    • Screening / confirmación: Incubar con RAH IgG HRP 1/3000 en leche 5% en PBS-tween 0’1% : 100 ul/pozo, 45 min
  • Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
  • Incubar 5min con TMB: preparar solución un rato antes y tapar de la luz (para que se atempere) : 100 ul/pozo
  • Parar la reacción con 50ul de H2SO4 25%
  • Leer a 450-570 nm

Resultado

12
A0,0520,087
B0,0610,074
C1,0890,104
D0,0550,084
E0,0620
F0,0680
G0,0630
H0,0660
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