2024.02.20: ELISA CASPR1 + Coating ELISA NF155 Y CNTN1

ELISA CASPR1

Muestras:

• 24-2-339 –> BOX 368
• 24-2-340 –> BOX 368
• 24-2-354 –> BOX 369
• 24-2-355 –> BOX 369
• 24-2-356 –> BOX 369
• 24-2-357 –> BOX 369
• 24-2-358 –> BOX 369
• 24-2-359 –> BOX 369
• 24-2-360 –> BOX 369
• 24-2-361 –> BOX 369
• 24-2-362 –> BOX 369
• 24-2-363 –> BOX 369
• 24-2-367 –> BOX 369
• 24-2-368 –> BOX 369

Protocolo:

• Bloquear con leche 5% en PBS-tween 0’1% : 200 ul pozo (incubar 1h a temp. ambiente)
• Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
• Diluir los  sueros:
  • Screening:  diluir sueros 1/100 en leche 5% en PBS-tween 0’1%
• Incubar con los sueros 1h a RT
• Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
• Ac secundarios:
  • Screening / confirmación: Incubar con RAH IgG HRP 1/3000 en leche 5% en PBS-tween 0’1% : 100 ul/pozo, 45 min
• Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
• Incubar 5min con TMB: preparar solución un rato antes y tapar de la luz (para que se atempere) : 100 ul/pozo
• Parar la reacción con 50ul de H₂SO₄ 25%
• Leer a 450-570 nm

Resultado:

Coating ELISA NF155 Y CNTN1

Protocolo:

• Preparar buffer coating: 100mL aigua destilada + 1 pastilla C3041 Sigma.
• Preparar dilución de proteína. Calculamos la concentración de proteína que pondremos en 2’5mL de buffer coating para rellenar los pocillos de proteína:

• Dispensar 50uL/ pozo de la dilución de proteína.
• Para hacer el blanco, dispensar 50uL/ pozo de buffer coating.
• Tapar la placa con parafilm y papel de plata. Dejar en agitación en la cámara fría (4ºC) durante toda la noche.