2024.02.19: ICQ Perfil nodales/paranodales BD

ICQ Perfil nodales/paranodales BD

CNTN1, NF140, NF155, NF186 (cels fijadas, suero 1/100)

6 culture slides transfectados el 30/01/2024

Muestras:

Control PositivoControls
24-2-0295BOX 367
24-2-0296BOX 367
24-2-0297BOX 367
24-2-0298BOX 367
24-2-0299BOX 367
24-2-0300BOX 367
24-2-0301BOX 367
24-2-0302BOX 367
24-2-0303BOX 367
24-2-0339BOX 368
24-2-0340BOX 368

Protocolo:

  • Incubar 1hora a T. ambiente los sueros diluidos a 1:100 con solución de bloqueo.
  • Lavar 3 veces con PBS 1X.
  • Incubar 1 hora con 30-40uL del Ac primario diluido a 1:500 con solución de bloqueo.
  • Lavar 3 veces con PBS 1X
  • Incubar 1 hora con 30-40uL del Ac secundario diluido a 1:500 con solución de bloqueo.
    • CNTN1: RAG488 + RAH594 a Rabbit Serum 1/40
    • NF155, NF140, NF186: GAC488 + GAH594 a Goat Serum 5%.
    • CASPR1: GAR 488 + GAH594
  • Lavar 3 veces con PBS 1X
  • Poner medio de montaje “fluoromount” i cobrir con un cubreobjetos.
  • Analizar resultados al microscopio de fluorescencia.

Resultado:

  Resultat
MostraBOXCNTN1NF140NF155NF186
Control PositivoControls++++++++++++
24-2-0295BOX 367+
24-2-0296BOX 367
24-2-0297BOX 367+?*
24-2-0298BOX 367
24-2-0299BOX 367++
24-2-0300BOX 367
24-2-0301BOX 367
24-2-0302BOX 367
24-2-0303BOX 367++
24-2-0339BOX 368
24-2-0340BOX 368
?*= confirmar por transfección en células vivas.
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