Protocolo:
- Bloquear con leche 5% en PBS-tween 0’1% : 200 ul pozo (incubar 1h a temp. ambiente)
- Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
- Diluir los sueros:
- Screening: diluir sueros 1/100 en leche 5% en PBS-tween 0’1%
- Incubar con los sueros 1h a RT
- Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
- Ac secundarios:
- Screening / confirmación: Incubar con RAH IgG HRP 1/3000 en leche 5% en PBS-tween 0’1% : 100 ul/pozo, 45 min
- Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
- Incubar 5min con TMB: preparar solución un rato antes y tapar de la luz (para que se atempere) : 100 ul/pozo
- Parar la reacción con 50ul de H2SO4 25%
- Leer a 450-570 nm
Muestras:
- Control negativo
- Control positivo
- 24-2-0294 –> BOX 367
- 24-2-0295 –> BOX 367
- 24-2-0296–> BOX 367
- 24-2-0297 –> BOX 367
- 24-2-0298 –> BOX 367
- 24-2-0299 –> BOX 367
- 24-2-0300 –> BOX 367
- 24-2-0301 –> BOX 367
- 24-2-0302 –> BOX 367
- 24-2-0303 –> BOX 367
- 24-2-0331 –> BOX 368
1 | 2 | 3 | 4 | |
A prot | Cneg | 24-2-0296 | 24-2-0300 | 24-2-0331 |
B blanc | Cneg | 24-2-0296 | 24-2-0300 | 24-2-0331 |
C prot | Cpos CASPR1 | 24-2-0297 | 24-2-0301 | |
D blanc | Cpos CASPR1 | 24-2-0297 | 24-2-0301 | |
E prot | 24-2-0294 | 24-2-0298 | 24-2-0302 | |
F blanc | 24-2-0294 | 24-2-0298 | 24-2-0302 | |
G prot | 24-2-0295 | 24-2-0299 | 24-2-0303 | |
Hblanc | 24-2-0295 | 24-2-0299 | 24-2-0303 |
Resultado:
1 | 2 | 3 | 4 | |
A | 0,048 | 0,049 | 0,158 | 0,058 |
B | 0,08 | 0,125 | 0,086 | 0,074 |
C | 1,502 | 0,243 | 0,793 | 0 |
D | 0,085 | 0,102 | 0,076 | 0 |
E | 0,047 | 0,335 | 0,053 | 0 |
F | 0,068 | 0,167 | 0,1 | 0 |
G | 0,035 | 0,045 | 0,049 | 0 |
H | 0,038 | 0,066 | 0,043 | 0 |