Muestras:
- Nervio ciático rata: antiguos
- 23-2-1355: comprobar positividad NF155
- Cneg
- Nervio ciático cerdo: hechos día 01/12/2023
- 23-2-1355: comprobar positividad NF155
- Cpos NF155
Protocolo: (entre cada paso hacer 3 lavados con PBS1x)
- Fijar con acetona (-20ºC) 10 min
- Separar los dos grupos de tejido con Dakopen
- Bloquear 1h RT con Goat serum 5% + 0’1% tritón
- Incubar con suero diluído 1/100 en Goat serum 5% + 0’1% tritón: 1h RT
- Incubar con ac anti-panNF diluído 1/500 en Goat serum 5% + 0’1% tritón 1h RT
- Incubar con ac secundarios GAH594 IgG + GAC488 diluídos 1/500 en Goat serum 5% + 0’1% tritón 1h RT
- Montar con Fluoromount
Resultado:
- Nervio ciático rata:
- 23-2-1355: marcaje paranodos
- Cneg: neg
- Nervio ciático cerdo: no se ve ningún paranodo… no están bien