2023.11.27: IHC teasing nervio ciático cerdo

Muestras: muestras Caspr1+

Uso portaobjetos preparados el día 24/11/2023

1. 23-409048 (23-2-1331)
2. 23-2-554
3. 23-2-1110
4. Cpos CNTN1+
5. Cneg 217-30
6. Cneg 217-31

Protocolo: (entre cada paso hacer 3 lavados con PBS1x)

• Fijar con acetona (-20ºC) 10 min
• Separar los dos grupos de tejido con Dakopen
• Bloquear 1h RT con Goat serum 5% + 0’1% tritón
• Incubar con suero  diluído 1/100 en Goat serum 5% + 0’1% tritón: 1h RT
• Incubar con ac anti-panNF diluído 1/200 en Goat serum 5% + 0’1% tritón  1h RT
• Incubar con ac secundarios GAH594 IgG + GAC488 diluídos 1/500 en Goat serum 5% + 0’1% tritón  1h RT
• Montar con Fluoromount

Resultado: este teasing no está demasiado bien… hay muy pocos paranodos y son muy muy pequeños

1. 23-409048 (23-2-1331): marcaje paranodos
2. 23-2-554: marcaje paranodos
3. 23-2-1110: marcaje paranodos
4. Cpos CNTN1+: marcaje paranodos
5. Cneg 217-30: negativo
6. Cneg 217-31: negativo