2023.10.24: ICC co-cultivos DRG -2- (día 47 – rata 07/09/2023) (Revisión)

Muestras:

1. GDP1 (CIDP15)
2. MRVM (136-8, coger CIDP78 cajas -80ºC)
3. Cneg

Protocolo cels vivas:

• Incubar con suero 1/100 diluído en medio NG mielinización: 2h a 37ºC
• Fijar 20min con PFA 4%
• Permeabilizar 10min con metanol -20ºC
• Bloquear con Goat serum 5%: 30min RT
• Incubar con anticuerpos primarios diluídos en Goat serum 5%: 2h a RT (los pongo juntos)
  •  anti–Caspr1 (ab34151) 1/200
  • anti-MBP (808401) 1/200
• Incubar con anticuerpos secundarios  GAH488 IgG + GAR594 + GAM647 diluídos  1/500 en Goat serum 5%: 1h RT
• Montar con Fluoromount

Resultado: CIDP15 marca mucho los axones y la mielina, CIDP78 marca bastante los axones y la mielina pero mucho menos (y no marca los paranodos).