Objetivo: ver si las IgG de la Bocanegra (22-2-374) marca el paranodo, tal y como vimos en el teasing del día 06/10/2023
Muestras:
- IgG 22-2-374 1/10
- Suero 22-2-374 1/100
- IgG 22-2-374 1/10 – doble panNF
- Suero CNTN1+ 1/100 – doble panNF
Protocolo: (entre cada paso hacer 3 lavados con PBS1x)
- Fijar con acetona (-20ºC) 10 min
- Separar los dos grupos de tejido con Dakopen
- Bloquear 1h RT con Goat serum 5% + 0’1% tritón
- Incubar con suero/IgG diluído en Goat serum 5% + 0’1% tritón (según diluciones anteriores) 1h RT
- Incubar con ac anti-panNF diluído 1/300 en Goat serum 5% + 0’1% tritón 1h RT
- Incubar con ac secundarios GAH594 IgG + GAC488 diluídos 1/500 en Goat serum 5% + 0’1% tritón 1h RT
- Montar con Fluoromount
Resultado: la muestra 22-2-374 (Bocanegra) marca claramente diferente a cómo marcaba anteriormente (esas estructuras helicoidales posiblemente bandas de Cajal). Puede ser que me haya equivocado de suero??? Repetir teasing con una alícuota nueva!!!
*Elba repite el teasing con una alícuota nueva y vuelve a marcar sólo los paranodos.
