Muestras:
- 23-2-554 absorbido (confirmar positividad CASPR1)
- Absorción: con extracto de HELA (congelado a -20ºC) : añado 150 ul de PBS1x a los 50 ul del extracto y le pongo 4 ul de suero 23-2-554 (para hacer concentración final de 1/50). Dejar en rotación a Tambiente durante 2 horas
- Cpos CNTN1+
Protocolo: (entre cada paso hacer 3 lavados con PBS1x)
- Fijar con acetona (-20ºC) 10 min
- Separar los dos grupos de tejido con Dakopen
- Bloquear con Goat serum 5% + 0’1% tritón 1h
- Suero 1/50 (en bloqueo) 1h
- Ac comercial anti-NF 1/500 (en bloqueo) 1h
- Ac secundarios: GAC488 + GAH594 IgG 1/1000 (en bloqueo) 1h
- Montar con Fluoromount
Resultado:
- 23-2-554: No se ve muy claro pero creo que sí que marca el paranodo : titular CASPR1 y subclases!!! (ya se hizo anteriormente y el título dio 1/2700, pero las subclases no salieron)
