Samples: N33 (control) and N36 (case)
Immunohistochemistry (in brain frozen sections):
- Fix with acetone (5 min)
- Wash with PBS 1x (3 x 5 min)
- Block with Blocking Goat (10 ml PBS + 0’5 ml Goat Serum + 0’2 g BSA) (30 min)
- Primary antibody: anti-NF. Diluted 1/100 in blocking goat
- Wash with PBS 1x (3 x 5 min)
- Secondary antibodies (1 h): GAH488 + GAC594 diluted 1/200 in blocking goat
- Wash with PBS 1x (3 x 5 min)
- Fluoromount mounting medium
RESULT:
En el caso (N36) se observa marcaje (GAH488) en las células de Purkinje (en comparación con el control N33).
En la tinción de NF155 con GAC594 no se ve ninguna estructura en concreto marcada, sino que se ve un marcaje muy intenso de neurofascina en todo el cerebro.