20170328 ICQ GDRs rata: neuropatías paraneoplásicas +controles+ otros pacientes IgM/IgG

Se analizan por neuronas de GDRs de rata por  IgM (suero 1/40) y/o IgG (1/150)algunas de las muestras de neuropatías paraneoplásicas del Hospital Clínic así como controles sanos y otros pacientes.

PACIENTES

IgGIgM
1MUJER 63 A (9/3/16)1MUJER 63 A (9/3/16)
2MUJER 63 A(17/03/16)2MUJER 63 A(17/03/16)
3MUJER 50 A (31/03/16)3MUJER 50 A (31/03/16)
4MUJER 58A (06/04/16)4MUJER 58A (06/04/16)
5HOMBRE 69A (13/04/16)5HOMBRE 69A (13/04/16)
6MUJER 55A (13/04/16)6MUJER 55A (13/04/16)
7MUJER 57A (27/04/16)7MUJER 57A (27/04/16)
8HOMBRE 49 A(25/10/16)8HOMBRE 49 A(25/10/16)
9GISELA 33A9GISELA 33A
10MUJER 60 A (6/05/13)10MUJER 60 A (6/05/13)
11ANA 25A (02/10/14)11ANA 25A (02/10/14)
12AIDA (01/10/14)12AIDA (01/10/14)
13MUJER 35 A (14/11/11)13MUJER 35 A (14/11/11)
14EDU 14EDU
15XAVI (27/11/14)15XAVI (27/11/14)
16NOEMI (19/01/16)16NOEMI (19/01/16)
17SILVIA (50A)17SILVIA (50A)
18MARIDO DOLORES CATALÀ18MARIDO DOLORES CATALÀ
19FCO JAVIER NAVARRO19FCO JAVIER NAVARRO
20HOMBRE 50 A20HOMBRE 50 A
21HOMBRE 80A21HOMBRE 80A
22HOMBRE 28A22HOMBRE 28A
23HOMBRE 36A23HOMBRE 36A
24HOMBRE 29A24HOMBRE 29A
25HOMBRE 29A25HOMBRE 29A
26MUJER 69A26MUJER 69A
27HOMBRE 49A27HOMBRE 49A
28MUJER 61A28MUJER 61A
29AMC (15-107)29AMC (15-107)
30Carmen Seguí (200-12)3016-3512
31Cot Mollo (9/2/16)31Carmen Seguí (200-12)
32Codou Pereda (15/03/17)32Cot Mollo (9/2/16)
33Codou Pereda (15/03/17)

PROTOCOLO

PRIMARIO:

  • Sacar 300ul de medio del propio cultivo y añadirle 2ul (IgG) o 7,5 (IgM) de suero del paciente en cada uno de los pocillos de placa de 12 donde haremos la inmuno. Mezclar bien con pipeta procurando no hacer espuma y colocar el cubre en el fondo del pocillo de una placa de 12 pocillos vigilando que quede bien cubierto. Incubar 1h a 37ºC (estufa).

FIJADO:

  • Vaciar el pocillo  lavar una vez con PBS 1X. Fijar con PFA comercial al 4% (aprox 300ul de PFA/pocillo) 5 min a temperatura ambiente.
  • Eliminar el PFA y lavar una vez con PBS 1X.

SEGUNDARIO:

  • Eliminar el PBS y añadir 300 mcL de el secundario GAH 488 IgM o IgG 1:1500 en Goat serum al 5%. Incubar 1h a temperatura ambiente.
  • Lavar cada cubre con H2O y montarlo sobre un porta con Vectashield.

RESULTADOS

IgGIgM
1MUJER 63 A (9/3/16)01MUJER 63 A (9/3/16)0
2MUJER 63 A(17/03/16)12MUJER 63 A(17/03/16)0
3MUJER 50 A (31/03/16)03MUJER 50 A (31/03/16)0
4MUJER 58A (06/04/16)04MUJER 58A (06/04/16)1
5HOMBRE 69A (13/04/16)05HOMBRE 69A (13/04/16)0
6MUJER 55A (13/04/16)06MUJER 55A (13/04/16)0
7MUJER 57A (27/04/16)07MUJER 57A (27/04/16)0
8HOMBRE 49 A(25/10/16)08HOMBRE 49 A(25/10/16)0
9GISELA 33A29GISELA 33A0
10MUJER 60 A (6/05/13)110MUJER 60 A (6/05/13)1
11ANA 25A (02/10/14)211ANA 25A (02/10/14)1
12AIDA (01/10/14)112AIDA (01/10/14)1
13MUJER 35 A (14/11/11)113MUJER 35 A (14/11/11)1
14EDU 014EDU 1
15XAVI (27/11/14)015XAVI (27/11/14)0
16NOEMI (19/01/16)116NOEMI (19/01/16)1
17SILVIA (50A)117SILVIA (50A)1
18MARIDO DOLORES CATALÀ118MARIDO DOLORES CATALÀ0
19FCO JAVIER NAVARRO119FCO JAVIER NAVARRO2
20HOMBRE 50 A220HOMBRE 50 A1
21HOMBRE 80A121HOMBRE 80A1
22HOMBRE 28A122HOMBRE 28A2
23HOMBRE 36A123HOMBRE 36A1
24HOMBRE 29A124HOMBRE 29A0
25HOMBRE 29A125HOMBRE 29A1
26MUJER 69A026MUJER 69A0
27HOMBRE 49A027HOMBRE 49A0
28MUJER 61A028MUJER 61A1
29AMC (15-107)429AMC (15-107)1
30Carmen Seguí (200-12)03016-35121
31Cot Mollo (9/2/16)031Carmen Seguí (200-12)0
32Codou Pereda (15/03/17)232Cot Mollo (9/2/16)1
33Codou Pereda (15/03/17)0
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