2024.02.27:ELISA CASPR1+ NF155 + NF140

ELISA CASPR1+ NF155 + NF140

Muestras CASPR1:

  • 24-2-0384 –> BOX 370
  • 24-2-0420 –> BOX 371
  • 24-2-0421 –> BOX 371
  • 24-2-0369 –> BOX 369
  • 24-2-0370 –> BOX 369
  • 24-2-0371 –> BOX 369
  • 24-2-0372 –> BOX 369
  • 24-2-0373 –> BOX 369
  • 24-2-0374 –> BOX 369
  • 24-2-0375 –> BOX 369

Muestras NF155 y NF140

  • 24-02-0357 –> BOX 369, confirmar NF-140
  • 24-02-.360 –> BOX 369, confirmar NF-140 y NF-155

Plantilla placa:

 12345
A protCneg24-2-042124-2-0372CnegCneg
B blancCneg24-2-042124-2-0372CnegCneg
C protCpos CASPR124-2-036924-2-0373Cpos NF140Cpos NF155
D blancCpos CASPR124-2-036924-2-0373Cpos  NF140Cpos   NF155
E prot24-2-038424-2-037024-2-037424-02-035724-02-0360
F blanc24-2-038424-2-037024-2-037424-02-035724-02-0360
G prot24-2-042024-2-037124-2-037524-02-0360 
Hblanc24-2-042024-2-037124-2-037524-02-0360 
Columnas 1,2 y 3 = CASPR1. Columna 4= NF140. Columna 5=NF155

Protocolo:

  • Bloquear con leche 5% en PBS-tween 0’1% : 200 ul pozo (incubar 1h a temp. ambiente)
  • Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
  • Diluir los  sueros:
    • Screening:  diluir sueros 1/100 en leche 5% en PBS-tween 0’1%
  • Incubar con los sueros 1h a RT
  • Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
  • Ac secundarios:
    • Screening / confirmación: Incubar con RAH IgG HRP 1/3000 en leche 5% en PBS-tween 0’1% : 100 ul/pozo, 45 min
  • Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
  • Incubar 5min con TMB: preparar solución un rato antes y tapar de la luz (para que se atempere) : 100 ul/pozo
  • Parar la reacción con 50ul de H2SO4 25%
  • Leer a 450-570 nm

Resultado:

12345
A0,0760,0860,222*0,1090,135
B0,1120,1750,1530,1280,183
C1,3640,1510,1070,1150,843
D0,0960,2590,1410,2380,229
E0,0710,130,120,1070,212
F0,0820,1480,1490,1690,311
G0,0830,1420,1250,1090
H0,0970,190,1640,3480
Repetir muestra 24-2-0372 y cambiar el CP de NF 140.
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