ELISA CASPR1+ NF155 + NF140
Muestras CASPR1:
- 24-2-0384 –> BOX 370
- 24-2-0420 –> BOX 371
- 24-2-0421 –> BOX 371
- 24-2-0369 –> BOX 369
- 24-2-0370 –> BOX 369
- 24-2-0371 –> BOX 369
- 24-2-0372 –> BOX 369
- 24-2-0373 –> BOX 369
- 24-2-0374 –> BOX 369
- 24-2-0375 –> BOX 369
Muestras NF155 y NF140
- 24-02-0357 –> BOX 369, confirmar NF-140
- 24-02-.360 –> BOX 369, confirmar NF-140 y NF-155
Plantilla placa:
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | |
A prot | Cneg | 24-2-0421 | 24-2-0372 | Cneg | Cneg |
B blanc | Cneg | 24-2-0421 | 24-2-0372 | Cneg | Cneg |
C prot | Cpos CASPR1 | 24-2-0369 | 24-2-0373 | Cpos NF140 | Cpos NF155 |
D blanc | Cpos CASPR1 | 24-2-0369 | 24-2-0373 | Cpos NF140 | Cpos NF155 |
E prot | 24-2-0384 | 24-2-0370 | 24-2-0374 | 24-02-0357 | 24-02-0360 |
F blanc | 24-2-0384 | 24-2-0370 | 24-2-0374 | 24-02-0357 | 24-02-0360 |
G prot | 24-2-0420 | 24-2-0371 | 24-2-0375 | 24-02-0360 | |
Hblanc | 24-2-0420 | 24-2-0371 | 24-2-0375 | 24-02-0360 |
Protocolo:
- Bloquear con leche 5% en PBS-tween 0’1% : 200 ul pozo (incubar 1h a temp. ambiente)
- Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
- Diluir los sueros:
- Screening: diluir sueros 1/100 en leche 5% en PBS-tween 0’1%
- Incubar con los sueros 1h a RT
- Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
- Ac secundarios:
- Screening / confirmación: Incubar con RAH IgG HRP 1/3000 en leche 5% en PBS-tween 0’1% : 100 ul/pozo, 45 min
- Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
- Incubar 5min con TMB: preparar solución un rato antes y tapar de la luz (para que se atempere) : 100 ul/pozo
- Parar la reacción con 50ul de H2SO4 25%
- Leer a 450-570 nm
Resultado:
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | |
A | 0,076 | 0,086 | 0,222* | 0,109 | 0,135 |
B | 0,112 | 0,175 | 0,153 | 0,128 | 0,183 |
C | 1,364 | 0,151 | 0,107 | 0,115 | 0,843 |
D | 0,096 | 0,259 | 0,141 | 0,238 | 0,229 |
E | 0,071 | 0,13 | 0,12 | 0,107 | 0,212 |
F | 0,082 | 0,148 | 0,149 | 0,169 | 0,311 |
G | 0,083 | 0,142 | 0,125 | 0,109 | 0 |
H | 0,097 | 0,19 | 0,164 | 0,348 | 0 |