2024.02.23: ICQ Perfil nodales/paranodales BD

ICQ Perfil nodales/paranodales BD

CNTN1, NF140, NF155, NF186 (cels fijadas, suero 1/100)

2 culture slide transfectado  06/02/2024 + 4 culture slides transfectados el 21/02/24

Muestras:

  • Control positivo
  • 24-2-0354 –> BOX 369
  • 24-2-0355 –> BOX 369
  • 24-2-0356 –> BOX 369
  • 24-2-0357 –> BOX 369
  • 24-2-0358 –> BOX 369
  • 24-2-0359 –> BOX 369
  • 24-2-0360 –> BOX 369
  • 24-2-0361 –> BOX 369
  • 24-2-0362 –> BOX 369
  • 24-2-0363 –> BOX 369
  • 24-2-0367 –> BOX 369

Protocolo:

  • Incubar 1hora a T. ambiente los sueros diluidos a 1:100 con solución de bloqueo.
  • Lavar 3 veces con PBS 1X.
  • Incubar 1 hora con 30-40uL del Ac primario diluido a 1:500 con solución de bloqueo.
  • Lavar 3 veces con PBS 1X
  • Incubar 1 hora con 30-40uL del Ac secundario diluido a 1:500 con solución de bloqueo.
    • CNTN1: RAG488 + RAH594 a Rabbit Serum 1/40
    • NF155, NF140, NF186: GAC488 + GAH594 a Goat Serum 5%.
    • CASPR1: GAR 488 + GAH594
  • Lavar 3 veces con PBS 1X
  • Poner medio de montaje “fluoromount” i cobrir con un cubreobjetos.
  • Analizar resultados al microscopio de fluorescencia.

Resultado:

  Resultado
MuestraBOXCNTN1NF140NF155NF186
Control PositivoControls+++++++++-?
24-2-0354BOX 369
24-2-0355BOX 369
24-2-0356BOX 369
24-2-0357BOX 369+?*
24-2-0358BOX 369
24-2-0359BOX 369
24-2-0360BOX 369++
24-2-0361BOX 369
24-2-0362BOX 369
24-2-0363BOX 369
24-2-0367BOX 369
?* = Confirmar por ELISA
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