2024.02.16: ELISA CASPR1 (screening)

Muestras:  muestras estudio CNTN1 Marta

  1. C27.1
  2. C28.1
  3. C33.1
  4. C6638/21 Stangassinger
  5. C7665/21 Thaler Klaus

Protocolo:

  • Bloquear con leche 5% en PBS-tween 0’1% : 200 ul pozo (incubar 1h a temp. ambiente)
  • Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
  • Diluir los  sueros:
    • Screening:  diluir sueros 1/100 en leche 5% en PBS-tween 0’1%
  • Incubar con los sueros 1h a RT
  • Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
  • Ac secundarios:
    • Screening / confirmación: Incubar con RAH IgG HRP 1/3000 en leche 5% en PBS-tween 0’1% : 100 ul/pozo, 45 min
  • Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
  • Incubar 5min con TMB: preparar solución un rato antes y tapar de la luz (para que se atempere) : 100 ul/pozo
  • Parar la reacción con 50ul de H2SO4 25%
  • Leer a 450-570 nm
 123456789101112
A protCneg33.1          
B blancCneg33.1          
C protCpos CASPR1C6638          
D blancCpos CASPR1C6638          
E prot27.1C7665          
F blanc27.1C7665          
G prot28.1           
Hblanc28.1           

Resultado:

 123456789101112
A prot0,2080,222          
B blanc0,4220,246          
C prot1,4610,229          
D blanc0,2030,292          
E prot0,2570,239          
F blanc0,3220,275          
G prot0,2140          
Hblanc0,30          
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