1 culture slide transfectado 30/01/2024
Muestras: comprobar positividad de CNTN1 en el paciente Albentberger (anteriormente: CNTN1 y CASPR1 en el onset, CASPR1 sólo en el follow-up), comprobar positividad de NF186 en un paciente de IMM (Reference)
CNTN1 | NF140 | NF155 | NF186 |
Albentberger onset (C3097/18) | 24-216938 | 24-216938 | 24-216938 |
Albentberger follow-up (C80/19) | C+ NF140/186 | C+ NF155 | C+ NF186 |
Protocolo:
- Incubar 1hora a T. ambiente los sueros diluidos a 1:100 con solución de bloqueo.
- Lavar 3 veces con PBS 1X.
- Incubar 1 hora con 30-40uL del Ac primario diluido a 1:500 con solución de bloqueo.
- Lavar 3 veces con PBS 1X
- Incubar 1 hora con 30-40uL del Ac secundario diluido a 1:500 con solución de bloqueo.
- CNTN1: RAG488 + RAH594 a Rabbit Serum 1/40
- NF155, NF140, NF186: GAC488 + GAH594 a Goat Serum 5%.
- CASPR1: GAR 488 + GAH594
- Lavar 3 veces con PBS 1X
- Poner medio de montaje “fluoromount” i cubrir con un cubreobjetos.
- Analizar resultados al microscopio de fluorescencia.
Resultado:
- Albentberger: CNTN1 neg (tanto onset como follow-up): en teoría tendría que ser positivo en el onset, pero descubrimos que la muestra que fue positiva era anterior a la muestra “onset” que ahora nos han enviado.
- 24-216938: NF140, NF155 y NF186 negativo (en IMM había salido NF186 positivo, retestar!)