2024.02.02: ICC Perfil nodales/paranodales BD

1 culture slide transfectado 30/01/2024

Muestras: comprobar positividad de CNTN1 en el paciente Albentberger (anteriormente: CNTN1 y CASPR1 en el onset, CASPR1 sólo en el follow-up), comprobar positividad de NF186 en un paciente de IMM (Reference)

CNTN1NF140NF155NF186
Albentberger onset (C3097/18)24-21693824-21693824-216938
Albentberger follow-up (C80/19)C+ NF140/186C+ NF155C+ NF186

Protocolo:

  • Incubar 1hora a T. ambiente los sueros diluidos a 1:100 con solución de bloqueo.
  • Lavar 3 veces con PBS 1X.
  • Incubar 1 hora con 30-40uL del Ac primario diluido a 1:500 con solución de bloqueo.
  • Lavar 3 veces con PBS 1X
  • Incubar 1 hora con 30-40uL del Ac secundario diluido a 1:500 con solución de bloqueo.
    • CNTN1: RAG488 + RAH594 a Rabbit Serum 1/40
    • NF155, NF140, NF186: GAC488 + GAH594 a Goat Serum 5%.
    • CASPR1: GAR 488 + GAH594
  • Lavar 3 veces con PBS 1X
  • Poner medio de montaje “fluoromount” i cubrir con un cubreobjetos.
  • Analizar resultados al microscopio de fluorescencia.

Resultado:

  • Albentberger: CNTN1 neg (tanto onset como follow-up): en teoría tendría que ser positivo en el onset, pero descubrimos que la muestra que fue positiva era anterior a la muestra “onset” que ahora nos han enviado.
  • 24-216938: NF140, NF155 y NF186 negativo (en IMM había salido NF186 positivo, retestar!)
Print Friendly, PDF & Email

Leave a Reply

Your email address will not be published. Required fields are marked *

This site uses Akismet to reduce spam. Learn how your comment data is processed.