2024.02.02: ELISA CASPR1 (screening)

Muestras:  muestras nuevas enviadas por Romana  Hoftberger (comprobar que  son CNTN1 y CASPR1), todavía no se han incluido en la base de datos

  1. Albentberger onset (C3097/18)
  2. Albentberger follow-up (C80/19)
  3. 24-2-180

Protocolo:

  • Bloquear con leche 5% en PBS-tween 0’1% : 200 ul pozo (incubar 1h a temp. ambiente)
  • Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
  • Diluir los  sueros:
    • Screening:  diluir sueros 1/100 en leche 5% en PBS-tween 0’1%
  • Incubar con los sueros 1h a RT
  • Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
  • Ac secundarios:
    • Screening / confirmación: Incubar con RAH IgG HRP 1/3000 en leche 5% en PBS-tween 0’1% : 100 ul/pozo, 45 min
  • Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
  • Incubar 5min con TMB: preparar solución un rato antes y tapar de la luz (para que se atempere) : 100 ul/pozo
  • Parar la reacción con 50ul de H2SO4 25%
  • Leer a 450-570 nm
 123456789101112
A protCneg3          
B blancCneg3          
C protCpos CASPR1           
D blancCpos CASPR1           
E prot1           
F blanc1           
G prot2           
Hblanc2           

Resultado:

 123456789101112
A prot0,1190,096          
B blanc0,1570,153          
C prot1,2340          
D blanc0,1040          
E prot0,1290          
F blanc0,2250          
G prot0,1190          
Hblanc0,1910          
  1. Albentberger onset (C3097/18): negativo
  2. Albentberger follow-up (C80/19): negativo
  3. 24-2-180: negativo
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