2024.01.18: ELISA CASPR1 (screening)

Muestras:

  • 24-2-23
  • 24-2-24
  • 24-2-25
  • 24-2-26
  • 24-2-41
  • 24-2-42

Protocolo:

  • Bloquear con leche 5% en PBS-tween 0’1% : 200 ul pozo (incubar 1h a temp. ambiente)
  • Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
  • Diluir los  sueros:
    • Screening:  diluir sueros 1/100 en leche 5% en PBS-tween 0’1%
  • Incubar con los sueros 1h a RT
  • Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
  • Ac secundarios:
    • Screening / confirmación: Incubar con RAH IgG HRP 1/3000 en leche 5% en PBS-tween 0’1% : 100 ul/pozo, 45 min
  • Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
  • Incubar 5min con TMB: preparar solución un rato antes y tapar de la luz (para que se atempere) : 100 ul/pozo
  • Parar la reacción con 50ul de H2SO4 25%
  • Leer a 450-570 nm
 123456789101112
A protCneg24-2-25          
B blancCneg24-2-25          
C protCpos CASPR124-2-26          
D blancCpos CASPR124-2-26          
E prot24-2-2324-2-41          
F blanc24-2-2324-2-41          
G prot24-2-2424-2-42          
Hblanc24-2-2424-2-42          

Resultado: no leo la placa porque se ve claramente que todo es negativo

  • 24-2-23: neg
  • 24-2-24: neg
  • 24-2-25: neg
  • 24-2-26: neg
  • 24-2-41: neg
  • 24-2-42: neg
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