Muestras:
- 24-2-23
- 24-2-24
- 24-2-25
- 24-2-26
- 24-2-41
- 24-2-42
Protocolo:
- Bloquear con leche 5% en PBS-tween 0’1% : 200 ul pozo (incubar 1h a temp. ambiente)
- Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
- Diluir los sueros:
- Screening: diluir sueros 1/100 en leche 5% en PBS-tween 0’1%
- Incubar con los sueros 1h a RT
- Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
- Ac secundarios:
- Screening / confirmación: Incubar con RAH IgG HRP 1/3000 en leche 5% en PBS-tween 0’1% : 100 ul/pozo, 45 min
- Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
- Incubar 5min con TMB: preparar solución un rato antes y tapar de la luz (para que se atempere) : 100 ul/pozo
- Parar la reacción con 50ul de H2SO4 25%
- Leer a 450-570 nm
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A prot | Cneg | 24-2-25 | ||||||||||
B blanc | Cneg | 24-2-25 | ||||||||||
C prot | Cpos CASPR1 | 24-2-26 | ||||||||||
D blanc | Cpos CASPR1 | 24-2-26 | ||||||||||
E prot | 24-2-23 | 24-2-41 | ||||||||||
F blanc | 24-2-23 | 24-2-41 | ||||||||||
G prot | 24-2-24 | 24-2-42 | ||||||||||
Hblanc | 24-2-24 | 24-2-42 |
Resultado: no leo la placa porque se ve claramente que todo es negativo
- 24-2-23: neg
- 24-2-24: neg
- 24-2-25: neg
- 24-2-26: neg
- 24-2-41: neg
- 24-2-42: neg