Muestras:
- Nervio ciático rata: antiguos
- 23-409048: comprobar positividad CASPR1
- Cpos 136-8
- Nervio ciático cerdo: antiguos
- 23-409048: comprobar positividad CASPR1
- Cneg
Protocolo: (entre cada paso hacer 3 lavados con PBS1x)
- Fijar con acetona (-20ºC) 10 min
- Separar los dos grupos de tejido con Dakopen
- Bloquear 1h RT con Goat serum 5% + 0’1% tritón
- Incubar con suero diluído 1/100 en Goat serum 5% + 0’1% tritón: 1h RT
- Incubar con ac anti-Caspr1 (ab34151) diluído 1/200 en Goat serum 5% + 0’1% tritón 1h RT
- Incubar con ac secundarios GAH594 IgG + GAR488 diluídos 1/500 en Goat serum 5% + 0’1% tritón 1h RT
- Montar con Fluoromount
Resultado:
- Nervio ciático rata:
- 23-409048: marcaje paranodos
- Cpos 136-8: marcaje paranodos
- Nervio ciático cerdo: no está demasiado bien… se ven pocos paranodos y pequeños
- 23-409048: marcaje paranodos
- Cneg: no marca nada
