Ha diferentes pruebas de tranfección en cubres y chamber slides.
Transfeccón de MRGPRD y de NF155 como control de inespecificidad
Uso sueron integral molecular a 1/100
Cubres: todas las muestars son negativas, se ve menos fondo si las hacemos vivas que fijadas. en las vivas incubamos como siempre primero el suero 1/100 y después de fijar el comercial de MRGPRD, y con el comercial se ven algunas células tranfectadas (patrón pacheado, morfología de las celulas redondas no apoptóticas)
Chamber slides: En células vivas comparo tranfección con MRGPRD–> las muestras son negativas ya que se ve la misma positividad en las células transfectadas y sin transfectar. Las células vivas dan menos fondo que si las fijo.
Chamber slides: En células fijadas comparo transfección MRGPRD y NF155. Veo que el marcaje es igual en MRGPRD y NF155. El anticuerpo comerncia MRGPRD marca levemente las células tranfectadas con NF155
CONCLUSIÓN: No hay muestras positivas para MRGPRD.
PLAN: confirmar que el plásmido usado es correcto.
