2023.10.26: IHC teasing nervio ciático rata

Muestras:

  1. 23-2-1110 (comprobar positividad Caspr1)
  2. Cpos CNTN1+

Protocolo: (entre cada paso hacer 3 lavados con PBS1x)

  • Fijar con acetona (-20ºC) 10 min
  • Separar los dos grupos de tejido con Dakopen
  • Bloquear 1h RT con Goat serum 5% + 0’1% tritón
  • Incubar con suero  diluído 1/100 en Goat serum 5% + 0’1% tritón: 1h RT
  • Incubar con ac anti-panNF diluído 1/300 en Goat serum 5% + 0’1% tritón  1h RT
  • Incubar con ac secundarios GAH594 IgG + GAC488 diluídos 1/500 en Goat serum 5% + 0’1% tritón  1h RT
  • Montar con Fluoromount

Resultado: parece que 23-2-1110 sí que marca los paranodos (repetir para reconfirmar)

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