Muestras:
- SB1
- SB2
- SB3
- SB4
- SB5
- SB6
- SB7
- SB8
- SB9
- SB10
- SB11
- SB12
- 23-2-1110: confirmar positividad Caspr1
Protocolo:
- Bloquear con leche 5% en PBS-tween 0’1% : 200 ul pozo (incubar 1h a temp. ambiente)
- Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
- Diluir los sueros:
- Screening: diluir sueros 1/100 en leche 5% en PBS-tween 0’1%
- Incubar con los sueros 1h a RT
- Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
- Ac secundarios:
- Screening / confirmación: Incubar con RAH IgG HRP 1/3000 en leche 5% en PBS-tween 0’1% : 100 ul/pozo, 45 min
- Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
- Incubar 5min con TMB: preparar solución un rato antes y tapar de la luz (para que se atempere) : 100 ul/pozo
- Parar la reacción con 50ul de H2SO4 25%
- Leer a 450-570 nm
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | |
| A prot | Cneg | SB3 | SB7 | SB11 | ||||||||
| B blanc | Cneg | SB3 | SB7 | SB11 | ||||||||
| C prot | Cpos CASPR1 | SB4 | SB8 | SB12 | ||||||||
| D blanc | Cpos CASPR1 | SB4 | SB8 | SB12 | ||||||||
| E prot | SB1 | SB5 | SB9 | 23-2-1110 | ||||||||
| F blanc | SB1 | SB5 | SB9 | 23-2-1110 | ||||||||
| G prot | SB2 | SB6 | SB10 | |||||||||
| Hblanc | SB2 | SB6 | SB10 |
Resultado:
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | |
| A prot | 0,066 | 0,048 | 0,045 | 0,039 | ||||||||
| B blanc | 0,074 | 0,097 | 0,082 | 0,064 | ||||||||
| C prot | 1,243 | 0,06 | 0,035 | 0,048 | ||||||||
| D blanc | 0,038 | 0,108 | 0,051 | 0,091 | ||||||||
| E prot | 0,04 | 0,037 | 0,036 | 0,299 | ||||||||
| F blanc | 0,054 | 0,05 | 0,061 | 0,079 | ||||||||
| G prot | 0,038 | 0,042 | 0,032 | |||||||||
| Hblanc | 0,061 | 0,077 | 0,034 |
- SB1: negativo
- SB2: negativo
- SB3: negativo
- SB4: negativo
- SB5: negativo
- SB6: negativo
- SB7: negativo
- SB8: negativo
- SB9: negativo
- SB10: negativo
- SB11: negativo
- SB12: negativo
- 23-2-1110: CASPR1 pos
