2023.10.20- ELISA LIF controles sanos (revisión)

Muestras:

1. C pos (GDP)
2. HC 42 136-6
3. HC 43 151-1
4. HC 44 151-4
5. HC 45 151-7
6. HC 46 151-9
7. HC 47 198-4
8. HC 48 198-5
9. HC 49 200-2
10. HC 50 201-9
11. HC 51 202-3
12. HC 52 204-15
13. HC 53 206-2
14. HC 54 206-7
15. HC 55 217-23
16. HC 56 217-25
17. HC 57 217-26
18. HC 58 217-28
19. HC 59 219-29
20. HC 60 217-31
21. HC 61 217-32
22. HC 62 217-33
23. HC 63 221-16
24. HC 64 21-2-1608
25. HC 65 21-3-1609
26. HC 66 23-2-569
27. HC 67 23-2-570
28. HC 68 23-2-571
29. HC 69 23-2-572
30. HC 70 23-2-573
31. HC 71 23-2-1040
32. HC 72 23-2-1041

Protocolo:

1. Lavar 3 veces con PBS-tween 0.1%
2. Bloquear con leche 5% en PBS-tween 0’1% – 200 ul pozo (incubar 1h a temp. ambiente).
3. Poner los sueros 1/100. Incubar con los sueros 1h
4. Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
5. Incubar 45min con anticuerpo secundario: RAH IgG HRP 1/3000 en leche 5% en PBS-tween 0’1% -100 ul/pozo
6. Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
7. Incubar 5min con TMB: preparar solución un rato antes y tapar de la luz (para que se atempere) -100 ul/pozo
8. Parar la reacción con 50ul de H₂SO₄ 25%
9. Leer a 450-620 nm

Resultado: Ha salido muy subido todo, repetiré HC 66 porque dobla