Muestras:
- IgG 136-8 1/10
- IgG 23-2-656 1/10
Protocolo: (entre cada paso hacer 3 lavados con PBS1x)
- Fijar con acetona (-20ºC) 10 min
- Separar los dos grupos de tejido con Dakopen
- Bloquear 1h RT con:
- Goat serum 5% + 0’1% tritón
- Bloqueo universal + 0,1% tritón
- IgG de suero 1/10 (en bloqueo) 1h
- Ac comercial:
- anti-Caspr1 1/100
- anti-CNTN1 1/100
- Ac secundarios (1/500):
- GAH594 IgG + GAR488
- RAH594 IgG + RAG488
- Montar con Fluoromount
Resultado:
- IgG 136-8: tanto la IgG como el Caspr1 marcan los paranodos (aunque flojo)
- IgG 23-2-656: no marcan los paranodos ni las IgG ni la CNTN1
