Portas: células transfectadas LGI4+ADAM22 menos últimos dos pozos no transfectadas. Fijado con PFA 4% 10 minutos
| LGI4+ Permeabilizado Primario: LGI4 | LGI4+ No permeabilizado Primario: LGI4 | LGI4+ Permeabilizado Primario: ADAM22 | LGI4+ No Permeabilizado Primario: ADAM22 |
| C neg Permeabilizado Primario: LGI4 | C neg Permeabilizado Primario: ADAM22 | LGI4+ Permeabilizado Primario: LGI4 | LGI4+ No Permeabilizado Primario: LGI4 |
Células no transfectadas ; resto cotransfectadas LGI4/ADAM22
Muestras:
- LGI4+
- Control negativo
Protocolo:
- Permeabilizar con triton 0.3% 5 minutos (algunos)
- Bloqueo goat serum 5%
- Suero 1/100 diluido en goat serum
- Ac primario 1/100 en goat serum 5%
- Anti-LGI4 invitrogen (PA5-60416) 1/100 (Rabbit)
- Anti-ADAM22 (invitrogen PA5-65610), dil 1/100 (Rabbit)
- 3x Lavados PBS 1x
- Ac secundarios GAR488 IgG + GAH594 IgG 1/500
- 3x lavados PBS1x
- Montar con Fluoromount
Resultado
