2023.08.08: ICC médula disgregada (sin glía) (día 19 – rata 20/07/2023)

Muestras: a partir del cubre 2 hago doble con NFh

1. CNTN1+ (21-2-94) doble CHAT
2. CNTN1+ (21-2-94, CNTN1+)
3. 22-2-374 (Caspr1+)
4. 136-08 (Caspr1+)
5. 23-2-656 (Caspr1+)
6. NF155+
7. NF140/NF186+
8. CIDP1 IgG
9. CIDP1 IgM
10. CIDP2 IgG
11. CIDP2 IgM
12. CIDP3 IgG
13. CIDP3 IgM
14. CIDP4 IgG
15. CIDP4 IgM
16. CIDP5 IgG
17. CIDP5 IgM
18. CIDP6 IgG
19. CIDP6 IgM
20. CIDP7 IgG
21. CIDP7 IgM
22. CIDP8 IgG
23. CIDP8 IgM
24. Cneg 204-05 IgG
25. Cneg 204-05 IgM
26. Cneg 204-06 IgG

Protocolo:

• Incubar con suero 1/100 (IgG) o 1/40 (IgM) en medio NG: 1h 37ºC
• 1 lavado con PBS
• Fijar 10 min con PFA 4%
• 1 lavado con PBS1x
• Incubar con anticuerpo primario diluído en Goat serum 5% (1h RT)
  1. NFh 1/500
  2. CHAT : AB144P Millipore, 1/50 (hacer todo con rabbit serum)
• 3 lavados con PBS1x
• Incubar 1h con Ac. secundarios diluídos en Goat serum 5% tritón 0’5% (todos a 1/750:
  1. Doble suero – NFh: GAH488 IgG o IgM + GAC594
  2. Doble suero – CHAT: RAH594 IgG + RAG488
• 3 lavados con PBS1x
• Montar con fluoromount

Resultado: el NFh se ve muy bien!!  FOTOS HECHAS (las tengo todas en una carpeta, aquí sólo pego las interesantes)

1. CNTN1+ (21-2-94) doble CHAT: +++ (el CHAT se ve a trozos)
2. CNTN1+ (21-2-94, CNTN1+): +++
3. 22-2-374 (Caspr1+): neg
4. 136-08 (Caspr1+): ++
5. 23-2-656 (Caspr1+): ++
6. NF155+ 212-14 (Morón): neg
7. NF140/NF186+ (RDP): + muy débil
8. CIDP1 IgG: neg
9. CIDP1 IgM: neg
10. 2 IgG: neg
11. 2 IgM: neg
12. 2 IgG: neg
13. 2 IgM: +
14. CIDP4 IgG: neg/+ débil
15. CIDP4 IgM: neg
16. CIDP5 IgG: neg
17. CIDP5 IgM: neg (marca algo punteado pero parece inespecífico
18. 2 IgG: neg
19. 2 IgM: neg
20. CIDP7 IgG: neg
21. CIDP7 IgM: neg
22. CIDP8 IgG: neg (mucho fondo)
23. CIDP8 IgM: repetir
24. Cneg 204-05 IgG: neg
25. Cneg 204-05 IgM: neg
26. Cneg 204-06 IgG: neg