2023.05.23: IHC Monkey sciatic nerve (prueba nuevos slides!!)

Muestras: 4 slides

1. Caja HNK – 2 (Disialosil)
2. Caja HNK – 3 (MAG)
3. Caja HNK – 34 (MAG títulos bajos)
4. Caja HNK – 36 (Sulfátidos)
5. Caja HNK – 43 (Mielina IgM)
6. 1598702 EM vacunas (mielina IgG)
7. 514508 EM vacunas (mielina IgG)
8. 960770 EM vacunas (mielina IgG)
9. Zika 004 (CS amielínicas IgG y IgM)
10. 206-04 (ELA, CS amielínicas IgG)
11. CNTN1+
12. NF155+
13. Cneg 198-03
14. Cneg 202-03
15. Anti-S100 (1/50, rabbit)
16. Anti-NCAM (1/50, mouse)

Protocolo: Monkey sciatic nerve slides (44685, Biosystems, Palex)

• Bloquear 30 min – 1h con Goat serum 5%
• Incubar 1h con 40 ul de suero diluído 1/10 en Goat serum 5% (4 ul suero + 36 ul goat 5%)
• 3 lavados con PBS1x
• Incubar 1h con 30-40 ul de Ac. secundarios :
  • 1-14: GAH monkey absorbed IgG 488 + GAH IgM 594 diluídos 1/750 en goat serum 5%
  • 15: GAR488
  • 16: GAM488
• 3 lavados con PBS1x
• Montar con fluoromount

Resultado: FOTOS. En general es casi igual que los nervios anteriores (de Werfen), aunque el marcaje de mielina IgG de las EM no es igual.

1. Caja HNK – 2 (Disialosil): mielina IgM
2. Caja HNK – 3 (MAG): mielina IgM
3. Caja HNK – 34 (MAG títulos bajos): Schwann cells amielínicas IgG, Fibros IgM
4. Caja HNK – 36 (Sulfátidos): mielina IgM
5. Caja HNK – 43 (Mielina IgM): mielina IgM
6. 1598702 EM vacunas (mielina IgG): mielina IgG
7. 514508 EM vacunas (mielina IgG): negativo!!!
8. 960770 EM vacunas (mielina IgG): mielina IgG débil
9. Zika 004 (CS amielínicas IgG y IgM): Schwann cells amielínicas IgG y IgM
10. Zika ZN004A: Schwann cells amielínicas IgG y IgM
11. CNTN1+: Schwann cells amielínicas IgG
12. NF155+: negativo (no veo paranodos)
13. Cneg 198-03: Schwann cells amielínicas IgG débil
14. Cneg 202-03: negativo IgG, fibros IgM
15. Anti-S100 (1/50, rabbit): no marca nada, no he puesto el S100 correcto
16. Anti-NCAM (1/50, mouse): marca muy bien las CS amielínicas