2023.01.11: ICC HEK-NCAM2

Objetivo: cribaje de ac anti-NCAM2 en cohorte de CIDPs con ICC de HEK transfectadas el 21/12 y el 28/12.

Muestras

1. CIDP 1
2. CIDP 2
3. CIDP 3
4. CIDP 4
5. CIDP 5
6. CIDP 6
7. CIDP 7
8. CIDP 8
9. CIDP 9
10. CIDP 10
11. CIDP 11
12. CIDP 12
13. CIDP 13
14. CIDP 14
15. CIDP 15
16. CIDP 16
17. CIDP 17
18. CIDP 18
19. CIDP 19
20. CIDP 20
21. CIDP 21
22. CIDP 22
23. CIDP 23
24. CIDP 24
25. CIDP 25
26. CIDP 26
27. CIDP 27
28. CIDP 28

Protocolo:

1. Bloquear con goat serum 5% 1h
2. Suero 1/50 en goat serum 1 hora
3. 3 lavados con PBS1 x
4. 1 hora Ac primario NCAM2: anti-NCAM2, ab115305 (abcam) — 1/100 (rabbit) en goat serum
5. 3 lavados con PBS1x
6. 1hora  Ac secundario diluido 1/500 en goat serum — GAR488 + GAH 594 IgG
7. 3 lavados  con PBS 1x
8. Montar con Fluoromount

Resultados

Las transfectadas el día 21/12 están bien pero las del día 28/12 hay muy pocas células transfectadas. Fijar 24h más tarde después de la transfección. CIDP 5, 6, 7, 8, 12, 16, 21, 22, 23, 24, 28 negativas. Resto no valorable (repetir CIDP 1, 2, 3, 4, 9, 10, 11 ,13, 14, 15, 17, 18, 19 , 20, 25, 26, 27)