Mostra: De Haro Mateo, Juan Carlos (NHC: 1768641) –> 6 tubs CPT
Protocol:
- Extreure 4 – 5 tubs CPT. Centrifugar 20 minuts a 1650 g sense fre a temperatura ambient.
- Invertir els tubs per resuspendre les cèl·lules al plasma i decantar els sobrenadants a un tub de 50 ml.
- Rentar amb suero fisiològic en una proporció 1:1 i centrifugar durant 5 minuts a 300g
- Treure el sobrenedant i fer un altre rentat amb suero fisiològic (posar 40 ml de suero).
- Centrifugar 5 minuts a 300 g i treure el sobrenedant.
- Ressuspendre en PBS i fer recompte de cèl·lules –> hi ha 30 milions: es congelen 10 vials de 3 milions (en 1 ml de FBS + 10% de DMSO)