2024.04.15: ICQ en células transfectadas con GPR101

Muestras:

• Control MAG+
• 22-2-0846
• 22 (18-577)-seca
• 23
• 26
• 56 (18560, 20-2-618)
• 59
• 86 (22-2-803)
• 87 (23-2-005)
• 91
• 100

Protocolo:

• Bloquear los slides 50uL de Goat Serum 5% durante 1 hora.
• Incubar 1hora a T. ambiente los sueros diluidos a 1:100 y a 1:50 con solución de bloqueo à Goat sèrum 5%.
• Lavar 3 veces con PBS 1X.
• Incubar 1 hora con 30-40uL del Ac primario (anti c-myc) diluido a 1:200 con solución de bloqueo.
• Lavar 3 veces con PBS 1X.
• Incubar 1 hora con 30-40uL del Ac secundario.
  • En la dilución 1/100 de la muestra
    • GAM 488 + GAH 594 diluido a 1:500 con solución de bloqueo.
  • En la dilución 1/50 de la muestra
    • GAM 488 IgG + GAH 594 IgM diluido a 1:500 con solución de bloqueo.
• Lavar 3 veces con PBS 1X.
• Poner medio de montaje “fluoromount” i cobrir con un cubreobjetos.

Analizar resultados al microscopio de fluorescencia.

Resultado –>Todas las muestras tienen un marcaje inespecífico con IgM. Repetiremos la ICQ con células vivas esta vez.