2023.11.10: ELISA CASPR1 (screening BD y titulación)

Muestras:

• 23-2-1145: screening CASPR1
• 23-2-1183: screening CASPR1
• 23-2-1184: screening CASPR1
• 23-2-1110: titulación y subclases CASPR1

Protocolo:

• Bloquear con leche 5% en PBS-tween 0’1% : 200 ul pozo (incubar 1h a temp. ambiente)
• Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
• Diluir los  sueros:
  • Screening:  diluir sueros 1/100 en leche 5% en PBS-tween 0’1%
• Incubar con los sueros 1h a RT
• Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
• Ac secundarios:
  • Screening / confirmación: Incubar con RAH IgG HRP 1/3000 en leche 5% en PBS-tween 0’1% : 100 ul/pozo, 45 min
• Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
• Incubar 5min con TMB: preparar solución un rato antes y tapar de la luz (para que se atempere) : 100 ul/pozo
• Parar la reacción con 50ul de H₂SO₄ 25%
• Leer a 450-570 nm

Resultado:

• 23-2-1145: neg
• 23-2-1183: neg
• 23-2-1184: neg
• 23-2-1110: título CASPR1 1/300, subclases todas negativas!! REPETIR