2023.11.06: IHC teasing nervio ciático rata

Muestras:

  1. 23-2-656 (Cpos CASPR1+)
  2. 23-2-1110 (comprobar positividad Caspr1)

Protocolo: (entre cada paso hacer 3 lavados con PBS1x)

  • Fijar con acetona (-20ºC) 10 min
  • Separar los dos grupos de tejido con Dakopen
  • Bloquear 1h RT con Goat serum 5% + 0’1% tritón
  • Incubar con suero  diluído 1/100 en Goat serum 5% + 0’1% tritón: 1h RT
  • Incubar con ac anti-Caspr1 diluído 1/100 en Goat serum 5% + 0’1% tritón  1h RT
  • Incubar con ac secundarios GAH594 IgG + GAR488 diluídos 1/500 en Goat serum 5% + 0’1% tritón  1h RT
  • Montar con Fluoromount

Resultado: la muestra 1110 marca los paranodos, se confirma que es CASPR1+

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