2023.07.03- ICC teasing nervio de rata – anti-LGI4 control positivo absorbido

Muestras:

1. LGI4+ absorbido 1/100
2. LGI4+

Protocolo

1. Fijar en acetona fría (-20ºC) en cubeta durante 10 minutos a temperatura ambiente
2. 3 lavados con PBS en cubeta durante 5 minutos
3. Marcar con Dakopen
4. Bloquear con goat serum 5%- tritón 0.1% durante una hora (100-200 uL )
5. Suero Anti-LGI4 en goat serum 5%- tritón 0.1% 1/100 y suero absorbido 1/100
6. 3 lavados PBS 1X
7. Anti-NF 1/500 en goat serum 5%- tritón 0.1% (Chicken)
8. 3 lavados PBS1X
9. Anticuerpos secundarios en goat serum 5%- tritón 0.1 –> GAH 594 + GAC488 IgG 1/1000
10. 3 lavados PBS1x
11. Montar con fluoromount

Resultados: rojo suero absorbido; verde neurofascin