Muestras:
- Control positivo anti-LGI4
- Control positivo anti-CNTN1
Protocolo:
- Fijar en acetona fría (-20ºC) en cubeta durante 10 minutos a temperatura ambiente
- 3 lavados con PBS en cubeta durante 5 minutos
- Marcar con Dakopen
- Bloquear con goat serum 5%- tritón 0.1% durante una hora (100-200 uL )
- Anti-LGI4 en goat serum 5%- tritón 0.1% // anti-CNTN1 1/100 1 hora
- 3 lavados PBS 1X
- Anti-NF 1/500 en goat serum 5%- tritón 0.1% (Chicken)
- 3 lavados PBS1X
- Anticuerpos secundarios en goat serum 5%- tritón 0.1 –> GAH 594 + GAC488 IgG 1/1000
- 3 lavados PBS1x
- Montar con fluoromount
Resultados:
Pan-NF verde, anti-CNTN1 rojo
Pan-NF verde, anti-LGI4 rojo