2023.05.26: ELISA NF140, NF155, NF186, CASPR1 (BD)

Muestras:

  • NF140:
    • 2023-271685: muestra panNF+ ICC (Immuno)
    • 23-2-554: muestra panNF+ ICC (Recerca)
  • NF155:
    • 2023-271685: muestra panNF+ ICC (Immuno)
    • 23-2-554: muestra panNF+ ICC (Recerca)
  • NF186:
    • 2023-271685: muestra panNF+ ICC (Immuno)
    • 23-2-554: muestra panNF+ ICC (Recerca)
  • CASPR1:
    • 23-2-540
    • 23-2-553
    • 23-2-554
    • 23-2-587
    • 23-2-588

Protocolo:

  • Bloquear con leche 5% en PBS-tween 0’1% : 200 ul pozo (incubar 1h a temp. ambiente)
  • Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
  • Diluir los  sueros : Screening:  diluir sueros 1/100 en leche 5% en PBS-tween 0’1%
  • Incubar con los sueros 1h
  • Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
  • Incubar 45min con RAH IgG HRP 1/3000 en leche 5% en PBS-tween 0’1% : 100 ul/pozo
  • Lavar 3 veces con PBS-tween 0’1%
  • Incubar 5min con TMB: preparar solución un rato antes y tapar de la luz (para que se atempere) : 100 ul/pozo
  • Parar la reacción con 50ul de H2SO4 25%
  • Leer a 450-570 nm
 123456789101112
A protCnegCnegCnegCneg23-2-554       
B blancCnegCnegCnegCneg23-2-554       
C protCpos panNFCpos panNFCpos panNFCpos CASPR123-2-587       
D blancCpos panNFCpos panNFCpos panNFCpos CASPR123-2-587       
E prot23-27168523-27168523-27168523-2-54023-2-588       
F blanc23-27168523-27168523-27168523-2-54023-2-588       
G prot23-2-55423-2-55423-2-55423-2-553        
H blanc23-2-55423-2-55423-2-55423-2-553        

NF140                   NF155                   NF186                   CASPR1

Resultado:

 123456789101112
A prot0,1050,0890,0830,090,510000000
B blanc0,0960,0940,0980,1060,1350000000
C prot0,2720,3160,5930,4780,1150000000
D blanc0,0880,090,0930,0920,1130000000
E prot0,0830,3130,1460,0980,0880000000
F blanc0,1060,1020,1050,0980,1160000000
G prot0,0970,1160,1020,09400000000
H blanc0,1180,0970,1110,11500000000
  • 23-271685: sólo NF155+
  • 23-2-554: NF140, NF155 y NF186 negativas. CASPR1 positiva!!!
  • 23-2-540: CASPR1 neg
  • 23-2-553: CASPR1 neg
  • 23-2-587: CASPR1 neg
  • 23-2-588: CASPR1 neg
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