Se reprecipita el DNA de la muestra de suero ct extraída el 23/01/2018, concretamente la muestra extraída a partir de 200 mcl de suero de Miquel de concentración 1.7 ng/mcL y 260/280:1.91 para resuspenderla en un volumen más reducido y aumentar así su concentración.
Protocolo
1- Añadir 2 volúmenes (con respecto al volumen de muestra de partida) de ETOH puro congelado a -80ºC.
2- Congelar a -20ºC 1 h.
3- Centrifugar 20 min a Vmax a 4ºC.
4- Eliminar el sobrenadante y lavar con 200 mcL EtOH 70%.
5- Centrifugar 10-15 min a Vmax a 4ºC.
6- Eliminar el sobrenadante y dejar secar el pellet a Tª ambiente 10 min (dentro de campana de extracción de gases).
7- Resuspender en 6 mcL de Buffer AE, el buffer de elución del kit de extracción Qiamp DNA Blood Mini kit (51104 Qiagen) .
8- Incubar en baño seco 20 min a 50 ºC para solubilizar el DNA.
Resultados
Concentración obtendia: 1.6 ng/mcL. 260/280:2.43. 260/230:-1.85
Conclusiones
Dado que la concentración de partida de la muestra era de 1.7 ng/mcL (260/280:1.91), la reprecipitación del DNA no ha sido un método útil para la concentración de nuestra muestra. No sólo no ha servido para aumentar la concentración si no que además ha disminuido la pureza de ésta,posiblemente por restos de etanol.
